深圳科软KR仿手工甩干式不堵孔洗板机之ELISA在转基因玉米检测中的应用

       不吸液：删除吸液针等吸液系统，利用旋转和重力去液。

       无污染：水平放板，旋转向下甩液，保证最大程度去液。独特锅底状接液设计，极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板：微孔内无残留，洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔：无吸液针，极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理，实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗，避免结晶堵塞。开关机自动维护，保证管路内畅通无阻。

       不撞针：注液针不移动，与微孔板保持足够距离，有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗：每块板可以任选条数进行清洗，节省洗液，保护环境。

       速度快：一次可洗1—6块板，KR306洗好6块板约4分钟。

        玉米螟是玉米的主要害虫之一，统计资料表明每年因玉米螟而造成的损失产量在5 %左右。2 0世纪9 0年代以来，通过转基因技术将苏云金杆菌的B t毒蛋白基因导人玉米而获得的抗玉米螟杂交种巳成为一种有效的防治玉米螟危害的方法。目前，在所有转基因玉米品种中，B t玉米的种植面积最大，效果良好，是大规模商业化的主要转基因玉米品种。
        刘光明等应用纯化的B tl杀虫晶体蛋白质作为标准蛋白和免疫抗原，通过抗体-抗原-酶抗体反应，建立了间接酶联免疫吸附测定法，对4 种进口转基因玉米实物样品进行了测定。在实验过程中，首先通过建立的间接E L I S A检测方法对B tl标准玉米样品、晶体蛋白及四种B tl玉米样品进行了检测，并根据检测结果，分别做出了 B tl蛋白的颗粒比标准曲线、B tl蛋白质质量浓度标准曲线。根据间接E L I S A法检测得到的B h 蛋白的颗粒比标准曲线与质量浓度标准曲线以及间接'法测定的玉米实物样品结果，可以换算得到样品颗粒比结果与质量浓度结果，并得到了免疫印证分析的验证。同时在实验中，还设立了阴性（N C ，颗粒比0 % ) 、阳性（P C、颗粒比0. 1 5 % )和空白（B C ，提取液）3 个对照，并与试剂盒法（双夹心抗体法）做了对比实验，对照以及对比实验结果一致，显示应用该方法检测玉米实物的结果是可靠的。与此同时，此种方法对蛋白质的质量浓度最低可检值为0. 312 jug/mL和颗粒比最低可检值为0. 1 5 %。该实验中建立的间接E L I S A检测方法不仅可以成功检测出转基因玉米中B tl蛋白，而且还具有优于试剂盒法的灵敏度，快速简便，降低了检测成本。
        李葱葱等采用了 E L I S A检测法对转基因抗虫玉米样品的4 个生长发育时期的不同部位的B t蛋白进行了定量分析。通过对样品玉米在雄前、抽丝、灌浆初期和乳熟末期这4 个时期的第1 0叶、第1 5叶、第2 1叶、茎表皮、茎髓、雄穗小花、花粉、雄穗秆、花丝、雌穗轴、雌穗柄、子粒共1 2个部位的取样、前处理后，用美国a g d k公司生产的E L I S A试剂盒对标准B t毒蛋白和样品进行检测，以标准B t毒蛋白质量浓度为纵坐标，以经E U S A 法测定的相对应O D 45„,m值为横坐标，绘制标准曲线1;以牛血清白蛋白（B S A )为标准，利用考马斯亮兰G 2 5 0法（Bradford法）测定的O D 595 ntn值随标准可溶性蛋白B S A 含量变化绘制标准曲线2。将样品测得的0 045。„1»值代人标准曲线1 所对应的线性方程，便可以计算出待测样品的Bt蛋白含量。

         通过与可溶性蛋白相比较，转基因抗虫玉米B t毒蛋白占可溶性蛋白的比例，可以看出，除花粉外，转基因玉米的其他1 1个部位B t毒蛋白含量及比例随着作物的生长周期的延伸呈上弁趋势。说明随着B t毒蛋白表达量的提高，玉米的抗虫能力会不断增强。由于E L I S A方法易受检测环境的温度和湿度等影响，所以在试验中，研究者选择了相同的实验环境，并且通过建立标准曲线降低了系统误差。同时以阴性玉米材料（即不表达B t毒蛋白）和空白为对照，未检出B t毒蛋白，也证实了实验结果的可靠性。该实验的B t毒蛋白最低检出量为0. 5 n g / m L。