深圳科软KR仿手工甩干式高效洗板机之李斯特氏菌的ELISA检测方法

       科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言，其最大特点是：1、不用人工拍板；2、不会堵针；3、故障低；4速度快。

       不吸液：删除吸液针等吸液系统，利用旋转和重力去液。

       无污染：水平放板，旋转向下甩液，保证最大程度去液。独特锅底状接液设计，极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板：微孔内无残留，洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔：无吸液针，极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理，实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗，避免结晶堵塞。开关机自动维护，保证管路内畅通无阻。

       不撞针：注液针不移动，与微孔板保持足够距离，有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗：每块板可以任选条数进行清洗，节省洗液，保护环境。

       速度快：一次可洗1—6块板，KR306洗好6块板约4分钟。

      李斯特氏菌，特别是单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜致病菌，可引起人和动物脑膜炎、败血症及孕妇流产等疾病，且死亡率极高，可达30 % 〜70 % 。该菌在自然界中广泛存在，肉、奶、蛋、水产品和蔬菜等均有不同程度的污染，该菌在4 °C冰箱保存的食物中也可繁殖生长，使其危害性增加。最初用于李斯特氏菌检验的方法为冷增菌法，此法培养物在4 °C培养3 0天，有时甚至长达一年。现在采用的常规方法为常温培养方法，这些方法大部分需要将样品在增菌液中分别培养24 h 至7 天，故需要7〜1 1天才能分离鉴定出李斯特氏菌。自1 9 8 5年以来，单克隆抗体、D N A 探针和P C R 等技术用于此菌的检验上已经取得了突破性的进展。
      用酶免疫方法检测食品中的李斯特氏菌，从2 0世纪8 0年代末到9 0年代初已有许多商品化产品供应于市场，最常见的有：Assurance Listeria (BioControl )、Listeria V I A (T E CR A ) ,Listeria Tek(Organon Teknika)、Clearview Listeria (Unipath Ltd)等。现以 A O A C996. 14《在精选食品中单增李斯特氏菌和相关李斯特氏菌( A S S U R A N C E ® 多克隆酶联免疫分析）》作一介绍。

      A O A C 公定方法996. 1 4可应用于检测乳制品、红肉、禽类产品、水果、坚果、海产品、意大利面制品、蔬菜、奶酪、巧克力和蛋品中的单增李斯特氏菌及其他李斯特氏菌的检测。
原理
      Assurance®多克隆酶联免疫分析( E I A ) ，将对单增李斯特氏菌和其他李斯特氏菌抗原有高度特异性的抗体固定在微孔内壁上。经增菌培养后的样品和阳性对照加到检测板的微孔内。如有李斯特氏菌抗原存在，则在微孔内形成抗体-抗原混合物。没有反应的样品物质被冲洗掉。加人抗李斯特氏菌特异抗体，重复孵育、冲洗程序，然后加人碱性磷酸酶结合剂，使酶与李斯特氏菌抗原相结合，孵育后，没有结合的物质被冲洗掉，用405 n m 〜410 n m 的光学测量仪读数，计算临界值。可疑阳性结果须经培养方法证实。