据南京巴傲得生物科技有限公司2013年9月18日10:00最新数据分析：南京权威质粒构建让您更专业,好的生物科技公司业内知名。巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、、最先进的蛋白表达、权威机构、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售，致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线：***
重组时选择你的目的基因上没有，而质粒的多克隆位点上有的酶切位点，一般重组质粒需要两个酶，所以你要选择两个酶切位点，注意尽量避免使用切出平末端的酶。重组引物设计时首先你要确定你选择的两个酶在的酶切位点在质粒的多克隆位点上的排列顺序，这个不能错，不然序列就会接反。一般设计重组引物的时候，在上游引物5’端前面加上载体多克隆位点排列在前面的酶切位点序列，在下游引物5‘端前面则加上后面的一个酶切位点，酶切位点加好后，注意5’端还需要加上保护碱基，这个具体你可以去查下内切酶的说明书。然后你要注意，根据你的载体需要，是否要在引物上带上启动子和终止子。
可以根据您的需要创造新的基因（质粒构建），表达后可拥有新的蛋白质，即通常说的重组蛋白或融合蛋白（质粒表达）。我举个例子，加入蛋白质ABC和DEFG分别由三个结构域和四个结构域组成，而你需要分子量小且具有第一个蛋白A结构域的功能和第二个蛋白中G结构域的功能，那么你可将AG基因克隆，装入载体后进行表达，这样产生了新蛋白AG。当然这只是理论上，新蛋白表达后是否能够具有原来AG的功能，能否表达出来，表达量高低等等都是你所要考虑的问题
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